EFISIENSI TRANSFORMASI PLASMID pTA7002-AtRKD4 PADA Agrobacterium tumefaciens EHA105 DENGAN METODE FREEZE THAW

Natanael, Fernando Prayogo (2017) EFISIENSI TRANSFORMASI PLASMID pTA7002-AtRKD4 PADA Agrobacterium tumefaciens EHA105 DENGAN METODE FREEZE THAW. S1 thesis, UAJY.

	Text (Halaman Judul) BL014010.pdf Download (1MB)
	Text (Bab I) BL014011.pdf Download (219kB)
	Text (Bab II) BL014012.pdf Download (566kB)
	Text (Bab III) BL014013.pdf Restricted to Registered users only Download (628kB)
	Text (Bab IV) BL014014.pdf Restricted to Registered users only Download (959kB)
	Text (Bab V) BL014015.pdf Download (963kB)

Abstract

Agrobacterium tumefaciens EHA105 merupakan salah satu strain yang sering digunakan sebagai perantara transformasi genetik untuk pembuatan tanaman transgenik. Salah satu langkah awal dalam pembuatan tanaman transgenik adalah menyediakan Agrobacterium tumefaciens yang mengandung DNA rekombinan. Transformasi DNA rekombinan ke Agrobacterium tumefaciens umumnya menggunakan metode freeze thaw. Penelitian ini dilakukan untuk meningkatkan efisiensi transformasi plasmid pTA7002-AtRKD4 pada Agrobacterium tumefaciens EHA105 menggunakan metode Freeze thaw. Optimasi dilakukan terhadap nilai OD600 kultur Agrobacterium tumefaciens EHA105 dan waktu inkubasi dalam nitrogen cair pada proses transformasi. Variasi nilai OD600 kultur yang digunakan adalah 0,2 hingga 0,7; sedangkan variasi waktu inkubasi dalam nitrogen cair yang digunakan adalah 3 hingga 7 menit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai OD600 kultur Agrobacterium tumefaciens EHA105 yang paling optimum dalam proses transformasi plasmid pTA7002-AtRKD4 adalah 0,5; dengan efisie nsi transformasi sebesar 3,39×103 CFU/μg. Waktu inkubasi dalam nitrogen cair yang paling optimum dalam proses transformasi plasmid pTA7002-AtRKD4 ke Agrobacterium tumefaciens EHA105 adalah 5 menit; dengan efisiensi transformasi sebesar 2,40×103 CFU/μg. Keberhasilan proses transformasi plasmid pTA7002-AtRKD4 pada Agrobacterium tumefaciens EHA105 dikonfirmasi dari hasil amplifikasi fragmen DNA dengan ukuran 380 bp yang merupakan gen AtRKD4 menggunakan metode PCR koloni.

Actions (login required)

View Item